分子生物学

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翻译样例: 野生型和突变型nm23-H1基因原核表达载体的构建、表达及纯化
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Nm23基因是近年来分离鉴定的一种肿瘤转移抑制基因,与人类多种肿瘤的浸润和转移有关。该基因家族由8个成员构成,其中研究最多的是nm23-H1基因,该基因在体外具有抑制转移潜能而不影响原发肿瘤大小的能力。但关于nm23-H1抑制肿瘤转移的生化机理目前并不清楚,已有研究表明不同位点的突变将影响nm23-H1的生物学功能。为此,本实验室构建了nm23-H1的野生型(wild type,WT)和P96S(96位脯氨酸→丝氨酸)、H118F(118位组氨酸→苯丙氨酸)突变型原核表达载体,拟进行进一步的实验研究。nm23-H1的基因产物与二类蛋白质高度同源,其中一类是果蝇的Awd蛋白;另一类为核苷二磷酸激酶(NDPK),而研究已证明果蝇的Awd蛋白就是NDPK。NDPK是一类广泛存在的酶,晶体图和生物化学资料表明,细菌的NDPK以四聚体形式存在,而从真核生物体中提取的nm23/NDPK则以六聚体形式存在。它被认为至少参与两个在肿瘤和发育上起重要作用的功能,即微管的聚合/解聚和G蛋白介导的信号传导。微管的聚合/解聚需要由NDPK介导的转磷酸作用所提供的GTP。因此nm23蛋白的改变,一方面可使微管聚合异常,而引起减数分裂时纺锤体的异常,从而导致癌细胞染色体非整倍体的形成,进而促进肿瘤的发展;另一方面可通过影响细胞骨架而引起细胞运动,从而参与浸润转移过程和发育过程。NDPK的第二个功能是在信号传导过程中使GDP还原

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